技術文章 / article
糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測試劑盒說明書
2018-05-08 瀏覽次數：4698
瑞士 BÜHLMANN 公司生產的糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測試劑 盒（酶聯免疫法）用于定量檢測人糞便中的鈣衛(wèi)蛋白 （MRP8/14; S100A8/S100A9）。
糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測試劑盒產品原理：
本試劑盒應用雙抗體夾心法，基于不同位點的兩種單 克隆抗-人鈣衛(wèi)蛋白抗體。標準品、質控品和稀釋后的待測 樣本加入到具有高親和力的單克隆抗-人鈣衛(wèi)蛋白抗體包被的微孔板微孔內。在*次孵育步驟中，樣本中鈣衛(wèi)蛋白被 固相抗體捕獲。加入酶聯物后第二次孵育時，形成以下復合 體：捕獲抗體-人鈣衛(wèi)蛋白-酶標抗體結合物。接著加入 TMB 底物進行顯色，加入酸液終止液終止顯色反應，溶液變成黃 色。黃色亮度與樣本中鈣衛(wèi)蛋白濃度成正比。zui后在酶標儀 450nm 波長處測量吸光度。做出標準品濃度對相應 OD 值的 標準曲線，在其上計算出樣本濃度。
糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測試劑盒ELISA 過程：
為獲取可重復的準確結果，清洗步驟是*的。洗滌液 加入到每個檢測孔后，每次必須至少孵育 20 秒，洗板次數 也要按照要求進行。 如使用自動洗板機，強烈建議使用“板模式”，可縮短孵育 時間。 檢測板震蕩參數：400-600 轉/分（<10HZ）。 建議標準品、校準品和標本做復孔，每次實驗都必須使用本 次新做的標準曲線。 如果某個未知樣本的檢測到的濃度比zui高的標準品濃度還 要高，則需要將這個未知樣本進一步稀釋并重新檢測，由此 產生的稀釋系數必須體現到計算結果中。
糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測試劑盒ELISA樣本采集和儲存：
提取程序需要的糞便樣本量為 50-100mg 將糞便樣本放入試管中，在 2-8 度可儲存 6 天 糞便樣本冷凍后，鈣衛(wèi)蛋白的濃度會略有上升。因此，如需 長期保持，建議將提取物儲存于-20 度，可保存至少 4 個月。 重要提示：樣本收集裝置不可含有其它生物或化學成分。
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